H1299-RFP熒光標(biāo)記細(xì)胞株圖片胞培養(yǎng)操作規(guī)程： 
主要功能：
（1）血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
變化：
（1）主動(dòng)脈硬化。
（2）主動(dòng)脈瘤
（3）主動(dòng)脈鈣化。
基本特性：
（1）組織來源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
（2）鑒定：肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（5）肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告
一、分離與培養(yǎng)：
    1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
    3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
    5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
    1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
    2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗（Abbioscience公司），然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
    5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗（嘉美生物公司）， 37℃條件下放置1h；
    6、用PBS沖洗3次，每次10min，后在倒置熒光顯微鏡(Leica公司)下觀察圖像并拍照。

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小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒 ，英文名： pERK ELISA Kit 普盧利沙星;普利沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)  Prulifloxacin   質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(p-ERK)ELISA試劑盒 ，英文名： p-ERK ELISA Kit 5-HIAA;5-羥基吲哚-3-乙酸(血清素代謝物)  5-HIAA  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,進(jìn)分

小鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)ELISA試劑盒 ，英文名： pAMPK ELISA Kit 頭孢地嗪酸;頭孢地嗪酸  Cefodizime acid  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR

小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA 試劑盒 試劑盒 組裝/原裝 3,4-二甲氧基肉桂酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  3,4-Dimethoxycinnamic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA檢測(cè)試劑盒MousePhosphotylinosital3kinase,PI3K 96T/48T 頭孢地嗪鈉  Cefodizime sodium  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR

小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒 ，英文名： PI3K ELISA Kit 頭孢地尼  Cefdinir  質(zhì)量規(guī)格：>92%,BR

小鼠0酸肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)ELISA試劑盒 ，英文名： PI3K2α ELISA Kit Boc-D-谷氨酰胺  Boc-D-Glutamine   質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR

小鼠0酸肌醇依賴性蛋白激酶1(PDPK1)ELISA試劑盒 ，英文名： PDPK1 ELISA Kit 赤霉素A4+7  Gibberllin A4+7  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR

小鼠0酸酶張力蛋白同源物(PTEN)ELISA試劑盒 ，英文名： PTEN ELISA Kit Alectinib；CH5424802  CH5424802   質(zhì)量規(guī)格：>98%,ALK抑制劑

小鼠0酸烯醇式酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒 ，英文名： PCK ELISA Kit 對(duì)甲氧基肉桂酸  p-Methoxycinnamic acid   質(zhì)量規(guī)格：AR,99%
小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒 ，英文名： PACAP ELISA Kit 9-(2',3',5'-三-氧基-苯甲基-β-D-阿糖)腺嘌呤  9-(2',3',5'-Tri-O-benzyl-β-D-arabinofuranosyl)adenine  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

大鼠活化蛋白C(APC)ELISA檢測(cè)試劑盒RatactivatedproteinC,APCELISAKit 96T/48T 紅-9-(2-羥基-3-壬烷基)腺嘌呤鹽酸鹽  EHNA hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

人β-肌動(dòng)蛋白(β-actin)免疫試劑盒 Human β-actin ELISA Kit 2-氟腺嘌呤  2-Fluoroadenine  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱MouseangiotensinogenELISAKit小鼠血管緊張素原(aGT)規(guī)格：96T/48T 硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸鈉鹽  Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate sodium salt  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

RNA酶溶液(RNA酶保護(hù)分析)50毫升 煙酸腺嘌呤二核苷鈉鹽  Nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate sodium salt  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

RabbitD-Dimer,D2DELISA試劑盒兔子D二聚體(D2D)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 煙酸腺嘌呤二核苷酸鈉鹽  Nicotinic acid adenine dinucleotide sodium salt  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(ADCYAP1)ELISA試劑盒 ，英文名： ADCYAP1 ELISA Kit α-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸  α-Nicotinamide adenine dinucleotide  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

人表皮角蛋白(EK)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanepidermalkeratin,EKELISAKit 96T/48T NAD+, 鋰鹽  NAD+, Lithium Salt  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

大鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)免疫試劑盒 Rat thioredoxin reductase,xR ELISA kit 9-甲基-d3-腺嘌呤  9-Methyl-d3 Adenine  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱RatOsteocalcin(OT)ELISAKit大鼠骨鈣素(OT)ELISAKit規(guī)格：96T/48T β-煙酰胺腺嘌呤二核苷, 縮減環(huán)已基銨鹽  β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, reduced tetra(cyclohexyl ammonium) salt  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
3,4-二甲氧基肉桂酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  3,4-Dimethoxycinnamic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA 試劑盒 試劑盒 組裝/原裝

頭孢地嗪鈉  Cefodizime sodium  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR 小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA檢測(cè)試劑盒MousePhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit 96T/48T

頭孢地尼  Cefdinir  質(zhì)量規(guī)格：>92%,BR 小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒 ，英文名： PI3K ELISA Kit

Boc-D-谷氨酰胺  Boc-D-Glutamine   質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR 小鼠0酸肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)ELISA試劑盒 ，英文名： PI3K2α ELISA Kit

赤霉素A4+7  Gibberllin A4+7  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR 小鼠0酸肌醇依賴性蛋白激酶1(PDPK1)ELISA試劑盒 ，英文名： PDPK1 ELISA Kit

Alectinib；CH5424802  CH5424802   質(zhì)量規(guī)格：>98%,ALK抑制劑 小鼠0酸酶張力蛋白同源物(PTEN)ELISA試劑盒 ，英文名： PTEN ELISA Kit

對(duì)甲氧基肉桂酸  p-Methoxycinnamic acid   質(zhì)量規(guī)格：AR,99% 小鼠0酸烯醇式酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒 ，英文名： PCK ELISA Kit

5-羥基色胺鹽酸鹽,血清胺鹽酸鹽  Serotonin hydrochloride(5-HT)  質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR 小鼠0酸烯醇式酸羧激酶1(PCK1)ELISA試劑盒 ，英文名： PCK1 ELISA Kit

巨大戟醇(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ingenol   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒 ，英文名： cAMP ELISA Kit

β-香樹素(標(biāo)準(zhǔn)品)  β-Amyrin   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠0脂肌醇3激酶(PI3-K)ELISA試劑盒 ，英文名： PI3-K ELISA Kit

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。