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          肝素鈉工藝流程

          2011年09月22日 10:25:31人氣:4347來源:上海研生生化試劑有限公司

          1、鹽解:將刮好的新鮮腸粘膜,每 100 斤腸粘膜加入清水 100 斤,按腸粘膜和水的總重量,加入 4%的 工業(yè)鹽,攪拌均勻,再加燒堿液調 PH 值為 8--9,緩慢升溫 50--55 度,加溫時每 10--20 分鐘加水攪拌一次,恒溫 2 小時,注意要間隔攪拌。恒溫結束后,要快速升溫到 96--98 度,恒溫 10 分鐘,趁熱撈出 上層的渣子。用 100 目尼龍布過濾。 注意加鹽過多會使下一步交換吸附含量超過規(guī)定,加鹽過少,肝素和蛋白質分離不*,堿性過強,會使肝素 降解破壞,收率下降。同時還能使一些蛋白質溶解度增大,造成過濾困難。堿性不足造成提取液偏酸,則 在高溫的情況下,肝素迅速破壞,升溫過急會使蛋白質早凝固,影響肝素的分解和溶出。
          2、吸附:待提取液溫度冷至 50--55 度,應檢測鹽濃度為 3。5--5%時,即可加入 5%已處理號的樹脂。 如樹脂上含有鹽水,需用清水將樹脂洗凈控干,方可使用。攪拌吸附 6--8 小時,轉速 60--80 轉/分鐘為 宜,攪拌須使樹脂上下翻動,否則吸附效果差,收率低。吸附完畢,棄去上層吸附液,然后用 100 目的尼 龍布過濾出樹脂。 加入提取液的樹脂量: 新樹脂可按提取液的 5--6%加入, 舊樹脂可按提取液的 8--10%。
          3、洗滌:過濾后的樹脂用 40 度左右的溫水,漂洗干凈。再放入與樹脂重量相等的鹽溶液中(鹽溶液的濃 度為 5%左右)洗滌 10--20 分鐘,除去低分子肝素和一些蛋白質,然后將樹脂過濾。
          4、洗脫:*次洗脫將過濾號的樹脂放入濃度為 20--22%的鹽溶液中攪拌洗脫 5--6 小時,樹脂和鹽水 的比例為 1:0。7。過濾后將樹脂控干進行第二次洗脫,調鹽溶液濃度為 16--18%,攪拌 3 小時以上, 樹脂和鹽水的比例與*次相同,過濾后的水即是藥液。
          5、除雜:將稀堿水加入洗脫后的藥液里,要快攪慢加,調 PH 值為 10--12 攪拌 2 分鐘,靜止沉淀 20 小 時后,抽出上層藥液,下沉的是雜質,且渣子放另外桶內過濾。過濾后的藥液和下次藥液除雜時合并待用。
          6、沉淀:將抽出除雜 后的藥液加入鹽酸調 PH 值為 7--7。5,即可加入酒精進行沉淀。向藥液里加入酒精 要快攪慢加。(由于酒精的濃度不同,因此沉淀肝素的酒精用量不等)用酒精計測量酒精度為 30--35%, 加蓋密封,沉淀 20 小時。棄去廢酒精收集糊狀肝素。注意在抽出廢酒精時,不可抽動沉淀的肝素。將多 次的肝素鈉漿收集在一起,以備集中脫水干燥。
          7、脫水:將的肝素鈉漿,用雙層的確良布過濾后放入 95%的酒精內浸泡 20 小時,加蓋密封。過濾 后按上述方法重復一次,使其充分的將肝素上的水分交換下來。
          8、干燥:待肝素鈉漿瀝干后,放在不銹鋼盤中烘干,用鏟子來回的翻動,溫度保持在 50--55 度,注意溫 度低于要求是不易烘干的,溫度高于 60 度時會使肝素鈉的生物活性下降。干燥后的肝素很易吸潮,應及 時用雙層塑料袋密封包裝,于通風干燥處存放。

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