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          人窖蛋白(Cav-1)免疫組化試劑盒?實(shí)驗(yàn)步驟

          2021年12月29日 10:26:28人氣:806來(lái)源:上海研生生化試劑有限公司

          人窖蛋白(Cav-1)免疫組化試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟(建議方案):


          1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr;


          2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;


          3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無(wú)水乙醇5min,95%乙醇2 次(每次2min),85%

          乙醇2 min;75%乙醇2min,自來(lái)水沖洗,ddH2O 洗2×2min;


          4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來(lái)水沖洗,ddH2O 洗2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見(jiàn)附1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第5 步封閉。


          5.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育30 min;


          6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過(guò)夜;


          7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);


          8.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育10 min;


          9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30 min;


          10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);


          11.封閉: 滴加試劑Tween 20,37℃濕盒孵育封閉20 min;


          12.加HRP-SA: 滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20 nM),37℃濕盒中孵育30 min;


          13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);


          14.顯色:應(yīng)用DAB 溶液(試劑F)顯色;


          15.復(fù)染:自來(lái)水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;


          16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;


          17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。

          (2NP-AMOZ)呋喃它酮代謝物單克隆抗體

          (2NP-SEM)呋喃西林酮代謝物單克隆抗體

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          磺胺嘧啶單克隆抗體

          磺胺二甲基嘧啶單克隆抗體

          磺胺二甲氧嘧啶單克隆抗體

          磺胺喹噁啉單克隆抗體

          磺胺對(duì)甲氧嘧啶單克隆抗體

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          四環(huán)素單克隆抗體

          金霉素單克隆抗體

          土霉素單克隆抗體

          強(qiáng)力霉單克隆抗體

          新霉素單克隆抗體

          卡那霉素單克隆抗體


          關(guān)鍵詞:顯微鏡
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