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          小鼠顱蓋成纖維細胞;OP9培養(yǎng)操作步驟

          2021年12月24日 15:50:35人氣:501來源:上海谷研實業(yè)有限公司

          小鼠顱蓋成纖維細胞;OP9培養(yǎng)操作步驟:

          1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。
          2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。
          3)置溫箱中2~5分鐘,當(dāng)發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮,間隙增大后,立即終止消化。
          4)吸除消化液,向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時,動作要輕,以免把已松動的細胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。
          5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。
          6)計數(shù)板計數(shù)后,把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。

          凍存過程:
          將貼壁細胞消化后離心收集,懸浮細胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細胞至終濃度約106/ml,加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中,用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜,次日保存到液氮中。

          人臍動脈內(nèi)皮細胞
          人臍靜脈平滑肌細胞
          人臍動脈平滑肌細胞
          人臍帶血單個核細胞
          小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(EGFP標記)
          人骨髓間充質(zhì)干細胞(hMSCs)
          人間充質(zhì)干細胞-脂肪
          人間充質(zhì)干細胞-肝
          人間充質(zhì)干細胞-臍帶
          小鼠神經(jīng)干細胞
          小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記)
          小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記)
          小鼠神經(jīng)干細胞(EGFP標記)
          人腦微血管內(nèi)皮細胞
          人腦血管平滑肌細胞
          人海馬神經(jīng)元
          人少突膠質(zhì)細胞
          人星形膠質(zhì)細胞
          小鼠成纖維細胞(EGFP標記)
          mCF, 小鼠心臟成纖維細胞
          MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元
          MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元
          MSC, 小鼠雪旺細胞
          MA, 小鼠星形膠質(zhì)細胞
          MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞
          mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞
          CSC, 小鼠心肌細胞
          mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓
          MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞
          NSC,大鼠神經(jīng)干細胞

           

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