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孟氏尖旋線蟲PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
豚鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)elisa檢測試劑盒
豚鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa檢測試劑盒
豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)elisa檢測試劑盒
豚鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira)elisa檢測試劑盒
豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)elisa檢測試劑盒
豚鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)elisa檢測試劑盒
豚鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)elisa檢測試劑盒
豚鼠鈣調(diào)素(CAM)elisa檢測試劑盒
豚鼠端粒酶(TE)elisa檢測試劑盒
豚鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)elisa檢測試劑盒
豚鼠膽堿脂酶(CHE)elisa檢測試劑盒
豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)elisa檢測試劑盒
豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa檢測試劑盒
豚鼠單胺氧化酶(MAO)elisa檢測試劑盒
豚鼠催產(chǎn)素(OT)elisa檢測試劑盒
豚鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)elisa檢測試劑盒
豚鼠促卵泡素(FSH)elisa檢測試劑盒
豚鼠雌激素(estrogen)elisa檢測試劑盒
豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)elisa檢測試劑盒
豚鼠表皮生長因子(EGF)elisa檢測試劑盒
豚鼠白三烯D4(LTD4)elisa檢測試劑盒
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展會(huì)城市:北京市展會(huì)時(shí)間:2025-06-18