耐藥株細(xì)胞PCR檢測試劑盒試劑準(zhǔn)備

2020年04月09日 14:45:02人氣：528來源：上海研生生化試劑有限公司

　　耐藥株細(xì)胞PCR檢測試劑盒試劑準(zhǔn)備

　　1. DNA模板

　　2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)

　　3.10×PCR Buffer

　　4.2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

　　5.Taq酶

　　注意事項

　　1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個的PCR實(shí)驗(yàn)室。

　　2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。

　　3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

　　4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

　　5.試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。

　　6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

　　7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。

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