人elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟：1）將蛋白樣品于等體積的2×上樣緩沖液混合，10000×g離心5min以除去蛋白質(zhì)沉淀；2）用微量注射器將蛋白質(zhì)樣品加入到上樣空底部，注意不要溢出來。注意：對于考馬斯亮藍染色液來說，每個泳道10-30ug的蛋白混合粗提物（我們俗稱粗抗原）或者5-10ug單一蛋白組分是較合理的上樣濃度。
電泳液：1）上槽中加入陰極電泳液（20mM：須由1M儲存液新鮮配置）；
     2）下槽中加入陽極電泳液（10mM磷酸：須由1M儲存液新鮮配置）。
等電聚焦電泳條件：1）接好電極；2）恒壓150V電泳30min；3）恒壓200V電泳2.5h，開始時候控制電流為10mA左右，在聚焦過程中電流有所下降，電泳內(nèi)室溫度在電泳的過程中將升至40－50攝氏度。
人elisa酶聯(lián)免疫試劑盒電泳聚焦后處理：
   測定pH梯度：1）將凝膠條切成0.5cm或1cm的小片；2）將每小片凝膠在1ml 10mM KCl中 浸泡30min；3）測讀此KCl溶液的pH值、
   凝膠的固定：1）將凝膠于10％中浸泡10min；2）換成1％溶液繼續(xù)浸泡至少2h以上，以去除載體兩性電解質(zhì)，浸泡過夜可以更好的降低考馬斯亮藍對載體兩性電解質(zhì)的染色。
   人elisa酶聯(lián)免疫試劑盒凝膠的染色：用考馬斯亮藍染色，然后脫色，制成干膠。