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感染細菌種屬常用的鑒定方法
1.細菌種屬的鑒定 DNA堿基組成的測定 G+C mol%含量不同的細菌,為不同種細菌;含量相同的可能為不同種的細菌。細菌的G+C mol%人elisa酶聯(lián)免疫試劑盒相當穩(wěn)定,不受培養(yǎng)條件、菌齡和其他外界因素影響。zui常用的方法是熱變性法。 DNA-DNA雜交 DNA雜交可得出DNA之間核苷酸順序的互補程度,從而推斷不同細菌基因組間的同源性。 16S rRNA同源性分析 rRNA-DNA雜交、16S rRNA序列測定、16S-23S rRNA序列測定 此外限制性內(nèi)切酶長度多態(tài)性分析(RFLP)、脈沖場凝膠電泳(PFGE)、隨機引物擴增法(RAPD)等技術(shù)常用于菌株間的差異比較。
2.細菌毒力基因 人elisa酶聯(lián)免疫試劑盒可以測定霍亂弧菌的霍亂毒素基因、產(chǎn)腸毒素大腸埃希菌的耐熱(ST)和不耐熱腸毒素(LT)以及白喉棒狀桿菌的外毒素基因以示相應(yīng)的細菌存在。
3.細菌種屬特異基因 某些基因為細菌種*或?qū)俟灿?,通過對這些基因的檢測可以鑒定細菌的種或?qū)?。如編碼吸附和侵襲上皮細胞表面蛋白的inv基因:invA、invB、invC、invD、invE等是一組只存在于致病性沙門菌中的*的保守基因序列。鞭毛蛋白dlh基因通常只存在于傷寒沙門菌;IS6110、IS986人elisa酶聯(lián)免疫試劑盒插入片段為結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群所擁有等。
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