ELISA試劑盒的選擇

醫(yī)藥人員，尤其是各大醫(yī)藥公司的動(dòng)物模型，臨床實(shí)驗(yàn)的研究人員在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中，需要選擇一些有疾病代表性的Biomarker，比如在特定適應(yīng)癥的臨床實(shí)驗(yàn)中的使用率，學(xué)術(shù)文章中的發(fā)表情況。如能有效掌握一些大數(shù)據(jù)，將給實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的合理性提供了保證。

*步：測(cè)什么Biomarker？
可以根據(jù)研究文獻(xiàn)的數(shù)量和臨床試驗(yàn)，比如TNF-a，在以下各大疾病的臨床實(shí)驗(yàn)中，和對(duì)應(yīng)文獻(xiàn)中均有使用。當(dāng)然在炎癥，心血管疾病，糖尿病等疾病中的臨床試驗(yàn)和使用zui多。
第二步：選什么試劑盒？
以TNF-a為例，Meso Scale Discovery® Vplex電化學(xué)發(fā)光試劑盒以0.04pg/mL的靈敏度是普通ELISA（7 pg/mL左右）的100多倍。如果實(shí)驗(yàn)樣本中的TNF-a低于7pg/mL,這就意味著實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)會(huì)無法檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)沒有定量結(jié)論。另外一個(gè)案例，臨床常規(guī)測(cè)定普通CRP的方法檢測(cè)線性一般為3~200mg/L，而預(yù)測(cè)心血管事需要更高靈敏度的CRP，超敏或高敏CRP （hs-CRP）。
如需要檢測(cè)的是尿液，檸檬酸鹽血漿樣本，需在訂購前仔細(xì)查看Elisa試劑盒說明書中的驗(yàn)證樣本。簡(jiǎn)單的說，如果ELISA試劑盒是沒有用過試劑盒檢測(cè)尿樣，檸檬酸鹽血漿，使用該試劑盒檢測(cè)尿樣會(huì)存在極大的風(fēng)險(xiǎn)；而且很多ELISA試劑盒中還會(huì)特別說明“不能檢測(cè)檸檬酸鹽血漿”。Vplex試劑盒驗(yàn)證過的樣本有血清， EDTA血漿，肝素血漿，檸檬酸鹽血漿，尿液，細(xì)胞上清液。
第三步：檢測(cè)什么樣本？試驗(yàn)周期多長(zhǎng)？
如自己采購抗體，開發(fā)ELISA方法學(xué)，如遇到抗體親和力低，由于ELISA的兩次洗脫將可能將抗體洗掉，大大影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。Meso Scale Discovery® 可以不用洗，2.5小時(shí)完成實(shí)驗(yàn)的一步法。
如實(shí)驗(yàn)研究周期較長(zhǎng)，ELISA試劑盒盡量選擇一個(gè)批次的，以防止不同批次間的差異。然而由于普通ELISA有效期在3-12個(gè)月，而實(shí)驗(yàn)周期往往在1-2年以上，一些長(zhǎng)期臨床實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目甚至在5-10年，因而經(jīng)常面臨不同批次的挑戰(zhàn)。而Meso Scale Discovery®Vplex試劑盒經(jīng)過54個(gè)月穩(wěn)定性測(cè)試。使用Vplex，*可以用一個(gè)批次支持2-3年的實(shí)驗(yàn)。