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一、操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本牛麥芽糖酶試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
48U/L 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
24 U/L 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12U/L 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6 U/L 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3 U/L 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:牛麥芽糖酶將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
二、牛麥芽糖酶操作程序總結(jié):
1.準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
2.加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng)30分鐘
3.洗板5次,加入酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)30分鐘
4.洗板5次,加入顯色液A、B,37℃反應(yīng)10分鐘
5.加入終止液
6.15分鐘之內(nèi)度OD值
7.計(jì)算
Mouse MGα1 ELISA Kit 小鼠α1微球蛋白(MGα1) 規(guī)格: 96T/48T
Mouse α1-Acid glycoprotein ELISA Kit 小鼠α1-酸性糖蛋白(α1-AGP) 規(guī)格: 96T/48T
Mouse TRAIL ELISA KIT 小鼠TRAIL 規(guī)格: 96T/48T
Mouse Tie-2 ELISA kit 小鼠Tie-2 規(guī)格: 96T/48T
Mouse Tie-1 ELISA kit 小鼠Tie-1 規(guī)格: 96T/48T
Mouse SDF-1—Stromal cell derived factor 1 ELISA kit 小鼠SDF-1β 規(guī)格: 96T/48T
Mouse Stem cell factor,SCF ELISA kit 小鼠SCF 規(guī)格: 96T/48T
Mouse sCD86 ELISA Kit 小鼠sCD86(sCD86) 規(guī)格: 96T/48T
Mouse S100 ELISA Kit 小鼠S100 規(guī)格: 96T/48T
Mouse substance P receptor ELISA Kit 小鼠P物質(zhì)受體(SP-R) 規(guī)格: 96T/48T
Mouse Substance P ELISA Kit 小鼠P物質(zhì)(SP) 規(guī)格: 96T/48T
Mouse P-Selectin ELISA kit 小鼠P-Selectin 規(guī)格: 96T/48T
Mouse Peiotrophin ELISA kit 小鼠Peiotrophin 規(guī)格: 96T/48T
Mouse P53 ELISA Kit 小鼠P53(P53)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Mouse Osteopontin,OPN ELISA kit 小鼠OPN 規(guī)格: 96T/48T
Mouse NF-kB ELISA Kit 小鼠NF-kB 規(guī)格: 96T/48T
Mouse L-Selectin ELISA kit 小鼠L-Selectin 規(guī)格: 96T/48T
Mouse lymphocyte function associated antigen-3 ELISA Kit 小鼠LFA-3(CD58) 規(guī)格: 96T/48T
Mouse CICP ELISA Kit 小鼠I型腺原蛋白C末端前肽(CICP) 規(guī)格: 96T/48T
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