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          研生試劑-合成/代謝elisa試劑盒檢測程序

          2014年05月27日 15:47:51人氣:680來源:上海研生生化試劑有限公司

                      研生試劑-合成/代謝elisa試劑盒檢測程序

          合成/代謝elisa試劑盒種屬有:人、牛、鼠、豬、兔。
            
            產(chǎn)品類型:ELISA試劑盒
            
            蛋白質(zhì)生物過程:合成/代謝
            
            蛋白質(zhì)生物過程:甲狀腺激素的生物合成
            
            檢測時間:1-5H
            
            樣品體積:50-100ul
            
            檢測wavelengt:450nm處
            
            合成/代謝elisa試劑盒在實驗前:
            
            在使用前,將所有試劑和樣品室溫。再次離心樣品解凍后測定前。據(jù)建議,所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)來測定一式兩份。
            
            1。準(zhǔn)備好所有試劑,工作標(biāo)準(zhǔn)和樣品在前面的章節(jié)中。
            
            2。請確定井?dāng)?shù)的使用,并把任何剩余的井和入袋干燥劑,密封保鮮袋,將未使用的井在4°C的含量布局表
            
            。每孔加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)和樣品。封面用膠粘帶提供。孵育2小時,在37℃下一盤布局記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品檢測。
            
            4。每孔中取出的液體,不洗。
            
            5。向每孔中加入100μl生物素抗體(1倍)。蓋上一個新的膠粘帶。孵育1小時,在37℃下(生物素抗體(1X)可能會出現(xiàn)混濁。預(yù)熱至室溫,輕輕混勻,直到出現(xiàn)均勻解決方案。)
            
            6。吸液的各孔和洗滌,共洗滌三次重復(fù)該過程兩次。洗凈,每孔填充洗滌緩沖液(200μL)使用噴瓶,多道移液器,歧管器,或autowasher,和,靜置2分鐘,*清除液體的每一步是*的良好的性能。zui后一次洗滌后,清除任何剩余洗滌緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂抹對干凈的紙巾。
            
            7。向每孔中加入100μl的HRP-抗生物素蛋白(1×)。量的微量滴定板,用一個新的粘接劑條。溫育1小時,在37℃下
            
            8。重復(fù)的愿望/洗滌過??程中,在步驟6的5倍。
            
            9。將90μlTMB底物添加到每個孔中。孵育15-30分鐘,在37℃下避光
            
            10。一站式解決方案,每孔加入底物,輕輕晃動酶標(biāo)板,以確保充分混合。
            
            11。在5分鐘內(nèi),設(shè)置至450nm,使用酶標(biāo)儀測定各孔的光密度。如果波長校正,設(shè)置為540nm或570nm處。在540nm或570nm波長在450nm處的讀數(shù)減去讀數(shù)。該減法校正板的光學(xué)缺陷。在450nm處未經(jīng)修正讀數(shù)直接,可能會比較高,不太準(zhǔn)確。
           

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