"Anti- Alpha-Synuclein/FITC??熒光素標記核突觸蛋白-α抗體IgG

標記抗體（一抗）

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相關知識>>>>>

多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟：
　　1、制備抗原。 　
　2、選擇實驗動物。
　　3、動物免疫。 　
　4、試取血進行測試，看看是否成功免疫。
　　5、如果成功免疫，殺死實驗動物，采集全部血清。
　　6、純化出抗體。 　
　7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
　　多克隆抗體：
定義1：由多個B細胞克隆所產(chǎn)生的抗體，可與不同抗原表位結合且免疫球蛋白類別各異。
所屬學科：免疫學（一級學科）；免疫系統(tǒng)（二級學科）；免疫分子（三級學科）
定義2：對特定抗原所產(chǎn)生的一組免疫球蛋白混合物，每種免疫球蛋白能識別抗原分子上的一個表位。
所屬學科：生物化學與分子生物學（一級學科）；總論（二級學科）
定義3：多種抗原表位刺激機體免疫系統(tǒng)后，機體產(chǎn)生的針對不同抗原表位的混合抗體。
所屬學科：細胞生物學（一級學科）；細胞免疫（二級學科）
標記抗體：
　 　抗體經(jīng)過酶標記、鐵蛋白標記或通過膠體金標記獲得標記抗體，是免疫電鏡樣品制備的一種方法，用于觀察抗原抗體免疫復合物方面研究的手段。
抗體的親和力 ：
是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵、疏水鍵、側鏈相反電荷基因的庫侖力、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示，K的單位是L/mol，通常K的范圍在 108 ～1010 /mol，也有多達 1014 /mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選，確定抗體的用途，驗證抗體的均一性等均有重要意義。
單克隆抗體：
　　（monoclonal antibody，McAb）克隆選擇學說：淋巴細胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結合的受體，一種細胞帶一種受體，進入機體的抗原選擇性的結合其中的個別淋巴細胞，使之活化，增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細胞群，分泌同樣的抗體。當抗原進入體內(nèi)，在機體中就會誘導出針對不同抗原決定簇的多種抗體，如果要把這些抗體一一分開，用現(xiàn)有的生物化學或物理化學方法是根本辦不到的。1975年科勒（Kohler）和米爾斯坦（Milstein）將小鼠免疫細胞與腫瘤細胞融合，培養(yǎng)出既能迅速生長無限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細胞。從而獲得針對某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體。1995年，Katherine Knight博士在美國芝加哥Loyola大學成功地從轉基因兔中獲得了骨髓瘤細胞（Plasmacytoma），開創(chuàng)了兔單克隆抗體技術。與鼠單抗相比，兔單抗具有：首先，兔抗血清通常含有高親和力抗體，可以比鼠抗血清識別更多種類的表位；其次，兔單克隆抗體能夠識別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原；第三，由于兔脾臟較大，可以更多進行的融合試驗，使得高通量篩選融合成為可能。
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