H1299-RFP熒光標記細胞株圖片胞培養(yǎng)操作規(guī)程： 
主要功能：
（1）血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應。
（3）與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關。
變化：
（1）主動脈硬化。
（2）主動脈瘤
（3）主動脈鈣化。
基本特性：
（1）組織來源于正常大鼠大動脈組織。
（2）鑒定：肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每凍存管細胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（5）肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

實驗報告
一、分離與培養(yǎng)：
    1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
    3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
    5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
    1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
    2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗（Abbioscience公司），然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
    5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗（嘉美生物公司）， 37℃條件下放置1h；
    6、用PBS沖洗3次，每次10min，后在倒置熒光顯微鏡(Leica公司)下觀察圖像并拍照。

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小鼠0酸化細胞外信號調節(jié)激酶(p-ERK)ELISA試劑盒 ，英文名： p-ERK ELISA Kit 5-HIAA;5-羥基吲哚-3-乙酸(血清素代謝物)  5-HIAA  質量規(guī)格：>98.0%,進分

小鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)ELISA試劑盒 ，英文名： pAMPK ELISA Kit 頭孢地嗪酸;頭孢地嗪酸  Cefodizime acid  質量規(guī)格：>90%,BR

小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA 試劑盒 試劑盒 組裝/原裝 3,4-二甲氧基肉桂酸(標準品)  3,4-Dimethoxycinnamic acid  質量規(guī)格：>98%,標準品

小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA檢測試劑盒MousePhosphotylinosital3kinase,PI3K 96T/48T 頭孢地嗪鈉  Cefodizime sodium  質量規(guī)格：>90%,BR

小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒 ，英文名： PI3K ELISA Kit 頭孢地尼  Cefdinir  質量規(guī)格：>92%,BR

小鼠0酸肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)ELISA試劑盒 ，英文名： PI3K2α ELISA Kit Boc-D-谷氨酰胺  Boc-D-Glutamine   質量規(guī)格：≥98%,BR

小鼠0酸肌醇依賴性蛋白激酶1(PDPK1)ELISA試劑盒 ，英文名： PDPK1 ELISA Kit 赤霉素A4+7  Gibberllin A4+7  質量規(guī)格：>90%,BR

小鼠0酸酶張力蛋白同源物(PTEN)ELISA試劑盒 ，英文名： PTEN ELISA Kit Alectinib；CH5424802  CH5424802   質量規(guī)格：>98%,ALK抑制劑

小鼠0酸烯醇式酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒 ，英文名： PCK ELISA Kit 對甲氧基肉桂酸  p-Methoxycinnamic acid   質量規(guī)格：AR,99%
小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒 ，英文名： PACAP ELISA Kit 9-(2',3',5'-三-氧基-苯甲基-β-D-阿糖)腺嘌呤  9-(2',3',5'-Tri-O-benzyl-β-D-arabinofuranosyl)adenine  質量規(guī)格：美國進口

大鼠活化蛋白C(APC)ELISA檢測試劑盒RatactivatedproteinC,APCELISAKit 96T/48T 紅-9-(2-羥基-3-壬烷基)腺嘌呤鹽酸鹽  EHNA hydrochloride  質量規(guī)格：美國進口

人β-肌動蛋白(β-actin)免疫試劑盒 Human β-actin ELISA Kit 2-氟腺嘌呤  2-Fluoroadenine  質量規(guī)格：美國進口

英文名稱MouseangiotensinogenELISAKit小鼠血管緊張素原(aGT)規(guī)格：96T/48T 硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸鈉鹽  Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate sodium salt  質量規(guī)格：美國進口

RNA酶溶液(RNA酶保護分析)50毫升 煙酸腺嘌呤二核苷鈉鹽  Nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate sodium salt  質量規(guī)格：美國進口

RabbitD-Dimer,D2DELISA試劑盒兔子D二聚體(D2D)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 煙酸腺嘌呤二核苷酸鈉鹽  Nicotinic acid adenine dinucleotide sodium salt  質量規(guī)格：美國進口

小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(ADCYAP1)ELISA試劑盒 ，英文名： ADCYAP1 ELISA Kit α-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸  α-Nicotinamide adenine dinucleotide  質量規(guī)格：美國進口

人表皮角蛋白(EK)ELISA檢測試劑盒Humanepidermalkeratin,EKELISAKit 96T/48T NAD+, 鋰鹽  NAD+, Lithium Salt  質量規(guī)格：美國進口

大鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)免疫試劑盒 Rat thioredoxin reductase,xR ELISA kit 9-甲基-d3-腺嘌呤  9-Methyl-d3 Adenine  質量規(guī)格：美國進口

英文名稱RatOsteocalcin(OT)ELISAKit大鼠骨鈣素(OT)ELISAKit規(guī)格：96T/48T β-煙酰胺腺嘌呤二核苷, 縮減環(huán)已基銨鹽  β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, reduced tetra(cyclohexyl ammonium) salt  質量規(guī)格：美國進口
3,4-二甲氧基肉桂酸(標準品)  3,4-Dimethoxycinnamic acid  質量規(guī)格：>98%,標準品 小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA 試劑盒 試劑盒 組裝/原裝

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5-羥基色胺鹽酸鹽,血清胺鹽酸鹽  Serotonin hydrochloride(5-HT)  質量規(guī)格：>97%,BR 小鼠0酸烯醇式酸羧激酶1(PCK1)ELISA試劑盒 ，英文名： PCK1 ELISA Kit

巨大戟醇(標準品)  Ingenol   質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品 小鼠0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒 ，英文名： cAMP ELISA Kit

β-香樹素(標準品)  β-Amyrin   質量規(guī)格：HPLC≥95%,標準品 小鼠0脂肌醇3激酶(PI3-K)ELISA試劑盒 ，英文名： PI3-K ELISA Kit

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。