BEL-7402-RFP熒光標(biāo)記細(xì)胞株說明書實(shí)驗(yàn)報(bào)告
一、分離與培養(yǎng)：
    1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，后將組織剪成1mm3左右大小；
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
    3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
    5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
    1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
    2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗（Abbioscience公司），然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
    5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗（嘉美生物公司）， 37℃條件下放置1h；
    6、用PBS沖洗3次，每次10min，后在倒置熒光顯微鏡(Leica公司)下觀察圖像并拍照。

胞培養(yǎng)操作規(guī)程： 
主要功能：
（1）血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
變化：
（1）主動(dòng)脈硬化。
（2）主動(dòng)脈瘤
（3）主動(dòng)脈鈣化。
基本特性：
（1）組織來源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
（2）鑒定：肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（5）肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

公司耐藥細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

英文名稱HumanAquaporin5人水通道蛋白5(AQP5)規(guī)格：96T/48T 2,2-二乙氧基苯乙酮(>95.0%(GC))  2,2-Diethoxyacetophenone  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

英文名稱Humanargininevasopressin人精氨酸加壓素規(guī)格：96T/48T 2,2-二甲氧基-2-乙酮(>98.0%(GC))  2,2-Dimethoxy-2-phenylacetophenone  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

英文名稱HumanAT-III人抗凝血酶(AT-III)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 2,4-二乙基硫雜蒽-9-酮(>90.0%(GC))  2,4-Diethylthioxanthen-9-one  質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(GC)

英文名稱HumanAβ1-40protein人Aβ1-40蛋白規(guī)格：96T/48T 2-乙基蒽醌(>98.0%(GC))  2-Ethylanthraquinone  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

英文名稱HumanAβ1-42protein人Aβ1-42蛋白規(guī)格：96T/48T 1-羥環(huán)己基苯酮(>98.0%(GC))  1-Hydroxycyclohexyl Phenyl Ketone  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

英文名稱HumanB1-AR人心肌細(xì)胞膜B1-AR規(guī)格：96T/48T 二苯基鎓六氟鹽(>97.0%(T))  Diphenyliodonium Hexafluorophosphate  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)

英文名稱HumanBAFF人B細(xì)胞活化因子(BAFF)規(guī)格：96T/48T 2-(4-甲氧苯基)-4,6-雙(三氯甲基) -1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))  2-(4-Methoxyphenyl)-4,6-bis(trichloromethyl)-1,3,5-triazine  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

英文名稱HumanBAFF-R人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)規(guī)格：96T/48T 三苯基化锍(>98.0%(T))  Triphenylsulfonium Bromide  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

英文名稱HumanBALP人BALP規(guī)格：96T/48T *基[3-(三乙氧基硅基)丙基]氯化銨(>98.0%(T))  Trimethyl[3-(triethoxysilyl)propyl]ammonium Chloride  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

英文名稱HumanBetacellulin人BTC規(guī)格：96T/48T 1-[3-(*氧基硅基)丙基]脲(>94.0%(N))  1-[3-(Trimethoxysilyl)propyl]urea  質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(N)
小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (S)-布洛芬  (S)-Ibuprofen  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

Rat prostaglandin E1 (PGE1) ELISA Kit 大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒 依那普利  Enalapril  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

Humancirculatingimmunecomplex,CICELISAKit 人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 1,3-二芐基-5-氟尿嘧啶  1,3-Dibenzyl-5-fluorouracil  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2ELISA試劑盒人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 1,3-二（芐氧基甲基)-5-氟尿嘧啶  1,3-Di(benzyloxymethyl)-5-fluorouracil  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

植物總RNA化試劑盒(高多糖/酚)20 5-氟乳清酸水合物  5-Fluoroorotic acid hydrate  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

HumanSurfactaProteinA，SP-AELISAKit人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 5-氟-1,3-二甲基尿嘧啶  5-Fluoro-1,3-dimethyluracil  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

小鼠程序性死亡1(PD-1)ELISA試劑盒 ，英文名： PD-1 ELISA Kit 5-氟尿嘧啶核苷  5-Fluorouridine  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

大鼠肝脂酶(HL)ELISA檢測(cè)試劑盒Rathepaticlipase,HLELISAKit 96T/48T 5-氟二氫嘧啶-2,4-二酮  5-Fluorodihydropyrimidine-2,4-dione  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

人β-防御素3 免疫試劑盒 Human β-defensins 3 ELISA Kit 舒馬曲坦-d6  Sumatriptan-d6  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱MouseangiotensionⅠELISAKit小鼠血管緊張素I(AngI)規(guī)格：96T/48T 舒馬曲坦-d6琥珀酸鹽  Sumatriptan-d6 Succinate  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
2-乙基蒽醌(>98.0%(GC))  2-Ethylanthraquinone  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 英文名稱HumanAβ1-40proteinELISAKit人Aβ1-40蛋白規(guī)格：96T/48T

1-羥環(huán)己基苯酮(>98.0%(GC))  1-Hydroxycyclohexyl Phenyl Ketone  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 英文名稱HumanAβ1-42proteinELISAKit人Aβ1-42蛋白規(guī)格：96T/48T

二苯基鎓六氟鹽(>97.0%(T))  Diphenyliodonium Hexafluorophosphate  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T) 英文名稱HumanB1-ARELISAKit人心肌細(xì)胞膜B1-AR規(guī)格：96T/48T

2-(4-甲氧苯基)-4,6-雙(三氯甲基) -1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))  2-(4-Methoxyphenyl)-4,6-bis(trichloromethyl)-1,3,5-triazine  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 英文名稱HumanBAFFELISAKit人B細(xì)胞活化因子(BAFF)規(guī)格：96T/48T

三苯基化锍(>98.0%(T))  Triphenylsulfonium Bromide  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 英文名稱HumanBAFF-RELISAKit人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)規(guī)格：96T/48T

*基[3-(三乙氧基硅基)丙基]氯化銨(>98.0%(T))  Trimethyl[3-(triethoxysilyl)propyl]ammonium Chloride  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 英文名稱HumanBALPELISAKit人BALP規(guī)格：96T/48T

1-[3-(*氧基硅基)丙基]脲(>94.0%(N))  1-[3-(Trimethoxysilyl)propyl]urea  質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(N) 英文名稱HumanBetacellulinELISAKit人BTC規(guī)格：96T/48T

芐?；鶡o色亞甲基蘭(>95.0%(HPLC)(T))  Benzoyl Leuco Methylene Blue  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T) 英文名稱humanBeta-EndorphinELISAKIT人β-內(nèi)啡肽(Beta-Endorphin)ELISAKIT規(guī)格：96T/48T

結(jié)晶紫內(nèi)酯(>95.0%(HPLC)(T))  Crystal Violet Lactone  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T) 英文名稱HumanbFGFELISAKit人堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)規(guī)格：96T/48T

6'-(二乙氨基)-1',3'-二甲基熒烷(>98.0%(HPLC)(T))  6'-(Diethylamino)-1',3'-dimethylfluoran  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) 英文名稱HumanBLC-1/CXCL13ELISAKit人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)規(guī)格：96T/48T