zui近研究人員開發(fā)出一種elisa酶聯(lián)免疫試劑盒基于新一代測序的分析，可檢測肺移植患者中的無細(xì)胞循環(huán)DNA，并從中發(fā)現(xiàn)排異和感染的跡象。
研究人員將他們的方法與目前的金標(biāo)準(zhǔn)方法（支氣管活檢）進(jìn)行比較，以監(jiān)控51名患者的移植排異反應(yīng)。他們發(fā)現(xiàn)，這種分析能夠提供急性和慢性排異的信息，曲線下面積為0.9，敏感性為*，特異性為73%。
盡管肺移植是晚期肺疾病患者的選擇，但臨床效果不好，平均存活時間僅為5.3年。手術(shù)后的并發(fā)癥包括感染、損傷，以及兩種類型的排異：急性細(xì)胞排異，35%的患者在移植一年內(nèi)發(fā)生，和慢性排異，這是移植患者死亡的主要原因。
目前，診斷排異的*方法就是通過支氣管活檢，這是侵入性的，診斷能力有限。診斷感染則需要訂購一套特異的病原體檢測。因此，研究人員決定開發(fā)一種基于NGS的檢測，以便對排異和感染進(jìn)行非侵入性的監(jiān)控。這種檢測依賴于無細(xì)胞循環(huán)DNA的測序。
在開展移植之前，研究人員利用SNP芯片對供體和受體進(jìn)行基因分型。手術(shù)之后，他們對患者的無細(xì)胞循環(huán)DNA進(jìn)行鳥/*全基因組測序。之后，他們根據(jù)SNP來確定來源于供體的無細(xì)胞DNA分子的比例。
為了確定什么水平的供體DNA會引起排異，研究人員首先檢查了無排異或感染證據(jù)的患者。研究人員指出，剛移植后，患者通常有大量的供體cfDNA，但它們的水平隨時間而下降。這個結(jié)果與心臟移植的患者相似。此外，供體cfDNA水平還取決于患者接受了兩個肺還是一個肺。
接下來，研究人員評估了排異患者中的供體cfDNA。elisa酶聯(lián)免疫試劑盒對于一名被診斷為中度排異的患者，研究人員發(fā)現(xiàn)排異時的供體cfDNA比基線水平高14.7%。對于一名嚴(yán)重排異的患者，供體cfDNA比基線水平高15.2%。
縱觀51名患者的398個時間點的測序數(shù)據(jù)，研究人員發(fā)現(xiàn)它符合排異的臨床表現(xiàn)。此外，在一些尚未表現(xiàn)出排異癥狀的時間點，供體cfDNA明顯升高。研究人員在研究cfDNA檢測與支氣管活檢的一致性時，發(fā)現(xiàn)曲線下面積為0.9，敏感性為*，特異性為73%。
zui后，研究人員還想看看他們是否能找到病原體感染的跡象。巨細(xì)胞病毒是器官移植患者中一種常見的感染。研究人員發(fā)現(xiàn)，他們能夠通過CMV基因組分析來鑒定序列。與病毒的臨床檢測相比，cfDNA分析的曲線下面積為9.1。他們也找到了患者感染其他病毒的證據(jù)。
考慮到急性排異和感染并發(fā)癥的高發(fā)，支氣管活檢的限制，以及測序分析的費用相對較低，elisa酶聯(lián)免疫試劑盒這種分析有望在未來幾年內(nèi)成為肺移植監(jiān)控的重要工具。