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          豬弓形蟲 (Tox)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書

          時(shí)間:2017/7/4閱讀:234
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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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          豬弓形蟲 (Tox)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用目的:
          本試劑盒用于測定豬血清,血漿及相關(guān)液體樣本中弓形蟲 (Tox)含量。
          實(shí)驗(yàn)原理
          本試劑盒應(yīng)用間接法測定標(biāo)本中人弓形蟲 (Tox)水平。用純化的豬弓形蟲 (Tox)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的弓形蟲 (Tox)標(biāo)準(zhǔn)品和未知濃度的弓形蟲 (Tox)待檢樣品,溫育后,加入生物素標(biāo)記的抗IgG抗體,再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的弓形蟲 (Tox)抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬弓形蟲 (Tox)濃度。
          相關(guān)產(chǎn)品:
          乳香酸    含量:    >95%    BOSWELLIC ACID, a-                                                                                   *
          四氫姜黃素    含量:    >95%    TETRAHYDROCURCUMIN                                                                                    進(jìn)口,*
          藤黃內(nèi)酯    含量:    >95%    HYDROXYCITRIC ACID LACTONE, (-)-                                                                      進(jìn)口/國產(chǎn)
          (-)-羥基檸檬酸內(nèi)酯    含量:    >95%    HYDROXYCITRIC ACID LACTONE, (-)-                                                                      現(xiàn)貨供應(yīng)
          天冬寧B     含量:    >95%    SHATAVARIN IV ;Asparanin B                                                                                       *
          腺苷酸環(huán)化酶激活劑    含量:    >95%    FORSKOLIN                                                                                             進(jìn)口,*
          新穿心蓮內(nèi)酯苷元    含量:    >95%    ANDROGRAPANIN                                                                                        進(jìn)口/國產(chǎn)
          鴨嘴花堿酮    含量:    >95%    VASICINONE                                                                                            現(xiàn)貨供應(yīng)
          鴨嘴花堿鹽酸鹽     含量:    >95%    VASICINE HCL                                                                                         *
          鹽酸奧克巴胺IV    含量:    >95%    WITHANOSIDE IV                                                                                       進(jìn)口,*
          鹽酸奧克巴胺V    含量:    >95%    WITHANOSIDE V                                                                                        進(jìn)口/國產(chǎn)

          標(biāo)本要求 
          1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
          2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
          豬弓形蟲 (Tox)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟
          根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
          加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣品孔。然后在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μl,在樣本反應(yīng)孔中先加入待測樣品10μl再加入樣品稀釋液40μl(樣品zui終稀釋度為5倍),蓋上封板膜,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。
          配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
          洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)4次,拍干。
          加生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體:每孔加入生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體50μl。37℃溫育30分鐘
          洗滌:操作同4。
          加鏈霉親和素-HRP:每孔加入50μl的鏈酶親和素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
          洗滌:操作同4。
          顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
          終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
          測定:豬弓形蟲 (Tox)酶聯(lián)免疫分析試劑盒以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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